نحوهی برش ژل بسیار آسان میباشد و تاثیر فراوانی بر روی کیفیت آنالیز طیف سنجی جرمی دارد. متن پیوست، روش مناسب برای جدا کردن صحیح باندها یا نقاط حاوی پروتئین از ژل را شرح میدهد. در خاطر داشته باشید:
- طیف سنجی جرمی روشی بسیار حساس میباشد به آلودگیها میباشد، بنابراین برای جلوگیری از آلودگی بیشتر توسط پروتئین های انسانی (کراتین، هموگلوبین و …) و محیطی، بسیار بسیار بسیار تمیز کار کنید. محل کار و وسایل را با اتانول کاملا تمیز نمایید، به هیچ وجه بدون دستکش به وسایل و ژل دست نزنید و از پاک بودن (حتی المقدور اتوکلاو شده) تیوب های انتقال ژل اطمینان حاصل نمایید.
- از دستکش های کیسه ای یا نیتریل و نه لاتکس استفاده کنید.
- میتوانید از تیغ، اسکالپل یا سر سمپلر بریده شده (بیشتر برای برش نقاط کوچک پروتئینی کاربرد دارد) برای برش یا جداسازی نقاط و باندها بهره ببرید.
- تنها بخش کاملا رنگ گرفته و فاقد قسمت های رنگ نشده را از ژل جدا کنید.
- اگر قرار است تعداد زیادی باند یا نقاط حاوی پروتئین از ژل جدا نمایید، برای جلوگیری از خشک شدن و پیچ خوردن ژل، آن را به صورت مداوم با آب دوبار تقطیر خیس نمایید.
- اگر باند شما بزرگ است، آن را به تکه های کوچکتر (4 تا 9 میلیمتر مربع) قسمت نمایید.
- در روش پیوست استیک اسید 1% به عنوان محلول نگه دارنده ژل معرفی شده است، پیشنهاد ما استفاده از اتانول 90% میباشد.
- پس از برش، تیوب های حاوی ژل را برای کوتاه مدت در یخچال (4 درجه سانتیگراد) و برای بلند مدت در فریزر (منفی 20 درجه سانتیگراد) نگه دارید
برای اطلاعات بیشتر در زمینهی بهترین حالت ارسال نمونه، با ما تماس بگیرید.
پروتکل برش ژل
تصویر نحوه مناسب برش
]]>